云南不同烟区红花大金元烟叶中多酚含量的差异性研究

　　摘要[目的]了解云南部分烟区种植的烟叶多酚含量及其差异。[方法]通过高效液相色谱定量分析法，对来源于昆明1区（石林县、宜良县）、大理、红河、昆明2区（晋宁县、安宁市、嵩明县）4个烟区的红花大金元（红大）上部烟叶和中部烟叶的绿原酸、芸香苷、咖啡酸和莨菪亭4种多酚类物质进行测定，并对不同部位、不同来源的烟叶多酚含量进行差异性分析。[结果]试验表明，不同烟区的红花大金元烟叶多酚含量差异较大，4个受检烟区中上部烟叶多酚含量从高到低依次是大理（38.21 mg/kg）、昆明1区（30.19 mg/kg）、昆明2区（29.07 mg/kg）和红河（26.98 mg/kg），极差达35.63%；不同部位的红花大金元烟叶多酚含量差异也较大，绿原酸在上部烟叶（B2F）的含量高出中部烟叶（C3F）12.22%～52.34%（平均33.31%），芸香苷高出21.10%～55.03%（平均39.12%），多酚物质总计高出27.62%～39.14%（平均34.17%）；红花大金元中上部烟叶中绿原酸和芸香苷2种主要多酚物质占多酚总量的61%和37%左右，其余多酚约为2%左右。红花大金元烟叶的多酚含量在不同栽培地区、不同部位上差异明显，气候冷凉、昼夜温差大的烟区（大理）明显高于气候温暖的烟区（红河），而气候条件居中的昆明的烟叶多酚含量也居中；同时，上部的烟叶多酚含量高于中部的烟叶。[结论]研究可为红花大金元品种栽培区划及卷烟工业提供参考。
　　关键词烟草；多酚化合物；红花大金元
　　中图分类号S572文献标识码A文章编号0517-6611（2014）22-07561-02
　　多酚类化合物在烟草的生长发育、调制特性、烟叶色泽、等级、烟气香吃味和烟气生理强度等方面起着重要作用，是衡量烟草品质的一个重要因素[1]。测定烟叶中的多酚含量对于了解烟叶香气质量和指导卷烟配方具有重要意义。烟草中多酚主要有单宁类（绿原酸）、香豆素类（莨菪灵、莨菪亭）和黄酮类（芸香苷、山萘酚糖苷）等，其中绿原酸和芸香苷的含量较高，二者含量就基本上可以反映卷烟中多酚的总量[2-5]。为了解不同烟区种植的烟叶多酚含量的情况，笔者对具有清香风格的云南特色烤烟品种红花大金元进行烟叶主要多酚物质含量测定，比较其差异性。
　　1材料与方法
　　1.1样品来源检测烟叶样品为2009年产自昆明1区（石林县和宜良林的混打复烤烟叶）、大理、红河、昆明2区（晋宁林、安宁市和嵩明林的混打复烤烟叶）不同烟区的红大上部烟叶（B2F级）和中部烟叶（C3F级）。检测指标包括绿原酸、芸香苷、咖啡酸和莨菪亭4种多酚类物质。不同烟区烟叶采样按照工业要求，分别对不同烟区B2F级、C3F级烟叶各采样10个，最后每个烟区制成5个B2F混合样、5个C3F混合样送检。
　　1.2检测方法 根据烟草行业标准YC/T 202-2006，用 50%甲醇水溶液萃取烟草和烟草制品中的多酚类化合物，萃取液经0.45 μm滤膜过滤后，通过高效液相色谱定量分析检测其中多酚类化合物的含量。
　　1.2.1样品处理。 称取0.100 0 g烟末样品，加入30 ml 80%的甲醇和4 ml 6 mol/L的盐酸溶液，在35 ℃水浴中超声提取15 min，取出上层清液；对剩余部分重复以上操作。过滤去除残渣，合并2次提取液，在37 ℃水浴中旋转蒸发、浓缩，用甲醇定容至25 ml，0.45 μm滤膜过滤，备用。
　　1.2.2样品检测。烟叶样品多酚类物质的测定参照谷勋刚等的方法[6]，用美国WATERS 2695高效液相色谱仪进行HPLC分析。色谱柱：Waters XterraTM RP18（1.0×50 mm，2.5 μm）；流动相A：水∶甲醇∶乙酸=88∶10∶2（体积分数），流动相B：水∶甲醇∶乙酸=10∶88∶2（体积分数）；柱温：30 ℃；梯度：0 min时A为100%，16.5 min时A为80%，B为20%，30 min时A为20%，B为80%；检测波长为340 nm，参比波长为480 nm。
　　1.3数据分析根据文献报道，不同部位烟叶中多酚含量有较大差异，同一类型烟叶中，上部叶中多酚含量最高，中部叶次之，下部叶最低[7-8]。该研究对不同烟区烟叶按照上部（B2F）、中部（C3F）烟叶分别求平均值进行差异性比较。数据处理采用Excel 2003，统计分析采用SPPSS 19.0软件。