血清MicroRNA—122作为脓毒症诊断特异性标志物的研究
【摘要】 目的 观察脓毒症患者的血清中MicroRNA-122的表达量在病程中的动态变化情况, 并且对此变化情况与脓毒症的发病程度之间关系进行探讨。方法 选取88例脓毒症患者作为观察组, 其中一般脓毒症患者40例作为一般脓毒症组、重症脓毒症患者48例作为重症脓毒症组;另选同期88例体检健康人作为对照组, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)对对照组入组时及观察组入组第1、3、5、7、14天血清中MicroRNA-122的表达量进行检测, 观察所有研究对象MicroRNA-122表达情况, 并比较观察组中不同组别的临床资料差异。结果 重症脓毒症组序贯器官衰竭评定量表(SOFA)评分(9.7±
3.4)分、急性生理学与慢性健康状况评估Ⅱ(APECHEⅡ)评分(18.9±6.5)分明显高于一般脓毒症组的(7.1±2.0)、(13.9±5.2)分, 慢性肾脏疾病发生率37.50%明显高于一般脓毒症组的12.50%, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。观察组入组第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表达量均明显低于对照组, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。同时间, 重症脓毒症组患者血清miRNA-122表达量均明显高于一般脓毒症组, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 血清中MicroRNA-122的表达量可以作为脓毒症诊断的特异性标志物, 还能够对脓毒症患者的疾病严重程度做出预警, 具有推广应用的价值。
【关键词】 血清MicroRNA-122;脓毒症;诊断特异性标志物;研究
DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.024
脓毒症是一种由于受到一些微生物感染所导致的临床综合症, 如果不能及时发现, 及时治疗, 就有可能发展成脓毒症休克, 甚至会使患者的多个器官出现功能性障碍[1, 2]。所
以, 作者选择了对脓毒症患者血清中MicroRNA-122的表达量的动态变化情况进行观察, 从而进一步探讨了此变化情况与脓毒症的发病程度之间的关系。具体报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 选取2015年10月~2017年10月在本院进行治疗的88例脓毒症患者作为观察组, 其中一般脓毒症患者40例作为一般脓毒症组、重症脓毒症患者48例作为重症脓毒症组;另选同期88例体检健康人作为对照组。观察组年龄19~85岁, 平均年龄(55.4±18.6)岁。对照组年龄22~81岁,
平均年龄(57.2±17.1)岁。观察组与对照组年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05), 有可比性。
1. 2 方法
1. 2. 1 实验主要仪器与试剂 仪器:MJ-Mini梯度PCR仪;试剂:mir Vana miRNA提取试剂盒、miRccute miRNA cDNA第一链合成试剂盒、荧光定量检测试剂盒;系统:实时荧光定量检测系统 [3]。
1. 2. 2 数据采集 对观察组患者的姓名、年龄、性别、病史等做好详细的记录。患者入院后的第1天对患者的具体病情进行估计并且做出评分[2]。将对照组的姓名、性别、年龄等基本信息也做好详细记录。
1. 2. 3 PNA提取和逆转录(RT)-PCR 对所有研究对象采静脉外周血, 其中对照组入组时采血, 观察组入组第1、3、5、7、14天采血。将血液中血清分离出来放在-80℃的冰箱内保存, 等待测量。按照mirVana miRNA试剂盒对血清中的总RNA进行提取。对提取出来的总RNA进行反转录, 随后对RT的反应体系进行配制, 将配制好的反应体系摇匀后再反转录(具体操作步骤可以参照试剂盒的使用说明书)。根据PCR试剂盒的说明书对PCR的反应体系进行确定 [4]。
1. 3 观察指标 ①比较观察组中不同组别的临床资料差异, 指标包括SOFA评分、APECHEⅡ评分、慢性肾脏病发生
情况。②比较对照组与观察组不同时间血清MicroRNA-122表达情况的差异。③一般脓毒症组与重症脓毒症组相同时间点血清MicroRNA-122表达情况的差异。
1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0統计学软件进行数据分析。正太分布计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验;非正态分布的计量资料采用中位数(四分位数)表示, 采用Mann-Whitney U检验;计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 一般脓毒症组与重症脓毒症组临床资料比较 重症脓毒症组SOFA评分(9.7±3.4)分、APECHEⅡ评分(18.9±
6.5)分明显高于一般脓毒症组的(7.1±2.0)、(13.9±5.2)分, 慢性肾脏疾病发生率37.50%明显高于一般脓毒症组的12.50%, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表1。
2. 2 观察组与对照组血清miRNA-122表达量比较 观察组入组第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表达量均明显低于对照组, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表2。
2. 3 一般脓毒症组与重症脓毒症组血清miRNA-122表达量比较 同时间, 重症脓毒症组患者血清miRNA-122表达量均明显高于一般脓毒症组, 差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表3。