摘 要：通过单因素试验和正交试验设计对假烟叶树叶中的多酚物质提取工艺进行了优化。结果表明，各因素对假烟叶树叶中多酚物质提取效果的影响从大到小排列依次为：乙醇浓度>固液比>提取时间>提取温度；最佳提取工艺为：乙醇浓度40%、提取温度90℃、固液比1︰30、提取时间1.0 h，连续提取2次；该条件下多酚物质的提取率为5.33%，提取物中多酚含量为24.98%，回收率达98.4%。
关键词：假烟叶树；多酚；乙醇；提取工艺；优化
中图分类号：Q946.82 文献标识码：A 文章编号：1006-060X（2015）08-0083-04
Abstract：This study investigated optimal conditions of extracting polyphenols from Solanum verbascifolium L.leaves with single factor and orthogonal experiment designs. The results showed that the effect of polyphenols extraction from Solanum verbascifolium L. leaves was influenced by such factors in the decreasing-degree order as concentration of ethanol> the ratio of raw materials to solvent > extraction time> extraction temperature. The optimum extraction conditions included the ethanol concentration at 40%， temperature at 80℃， ratio of solid to liquid at1：20， and extraction for1.5h and 2 times， under which the yield of polyphenols could reach as high as 5.33%， the content of the extract was 24.98% and the recovery rate of polyphenols was 98.4%.
Key words：Solanum verbascifolium L.； polyphenol； ethanol； extraction process； optimization
假烟叶树（Solanum verbascifolium L.），又名野烟叶、土烟叶、山烟、野茄树，属茄科茄属植物。生于海拔300～2 100 m的向阳路边、荒地，分布于福建、台湾、广东、海南、广西、四川、贵州和云南等地；其根、叶、果均可入药，具小毒，有解毒消肿、除风止痛、凉血止血的功效[1-4]。Adam等[5]的研究表明，假烟叶树中含有澳洲茄碱、澳洲茄边碱、薯蓣皂苷元等生物活性成分。目前，对假烟叶树的商业化开发利用较少，基于民间对假烟叶树的使用多为水提取物，而上述文献中的化学物质多为亲脂性成分，它们在水中溶解度很小。因此，有必要对假烟叶树中的亲水性成分做进一步研究，以期明确其中的活性成分，为假烟叶树的开发应用提供依据。
前期的研究发现，假烟叶树叶中含有多种多酚类化合物，鉴于天然多酚类化合物具有的抗氧化作用以及强化血管壁、促进肠胃消化、降血压降血脂、预防动脉硬化和血栓形成、增强人体免疫力、抑制细菌和癌细胞生长等多种功效[6-9]，笔者对假烟叶树叶中的多酚物质进行了提取，并对提取工艺进行了优化，获得活性成分含量较高的提取物，为假烟叶树多酚物质的后期开发利用奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试假烟叶树叶于7月采自广东省假烟叶树种植基地，为当年新生茎叶，60℃恒温干燥后粉碎备用。
供试试剂有色谱甲醇（国药集团化学试剂公司），Folin-C试剂、没食子酸标准品（成都曼思特生物技术有限公司，纯度97%），95%食用乙醇（市购）。
主要仪器设备有LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津公司）、WondasilTM Cl8色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）、UV-2600 紫外可见分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）、RE-52AA 旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）、HH数显恒温水浴锅（金坛市金城国胜实验仪器厂）、SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵（郑州长城科技工贸有限公司）、DHG-9146A型电热鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）。
1.2 试验方法
1.2.1 假烟叶树叶乙醇提取物的HPLC检测 取假烟叶树叶原料用10倍甲醇60℃回流提取1 h，提取液进行HPLC分析。色谱条件为：甲醇（B相），水（A相），梯度洗脱：0 min（B：5%，A：95%）→30 min（B：30%，A：70%），输出波长320 nm，流速1 mL/min，柱温30℃。
1.2.2 假烟叶树乙醇提取物中多酚含量的检测方法 （1）标准曲线的绘制。精确称取104 mg没食子酸于100 mL容量瓶中，经水超声溶解，冷却定容得母液1.0088 mg/mL，分别取母液1.0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0 mL于100 mL容量瓶中，加50 mL水，再加5 mL Folin-C试剂，摇匀后再加入15 mL 20%Na2CO3溶液，用水定容至刻度，于30℃反应2 h后以空白样品调零，在765 nm波长下测定标准溶液的吸光度，以没食子酸质量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。（2）样品含量的检测。精确称取0.5 g假烟叶树样品，加入100 mL 60%乙醇，80℃回流提取2 h，过滤，滤液定容至250 mL，吸取0.5 mL溶液，于100 mL容量瓶中，其他操作与标准品相同，于765 nm处测定吸光值，根据标准曲线计算假烟叶树中多酚含量。