六种冬青属苦丁茶叶片中绿原酸含量的RP—HPLC分析
摘要：采用超声提取和RP-HPLC法分析了6种冬青属苦丁茶新干燥的功能叶及苦丁茶冬青植物在不同发育阶段、不同地域、野生与栽培材料、不同存放时间下功能叶中的绿原酸含量。结果表明，不同样品材料中的绿原酸含量由大到小排序依次为苦丁茶冬青、霍山冬青、大叶冬青、五棱苦丁茶、华中枸骨、枸骨;新干燥的成熟叶样品在室温下存放2个月后绿原酸的含量显著下降;在野生的苦丁茶冬青叶片不同发育阶段中，一般是以老叶样品中的绿原酸含量高;野生苦丁茶冬青植株叶片中绿原酸的含量要高于栽培植株叶片中绿原酸的含量。6种冬青属苦丁茶叶片样品中的绿原酸含量存在较大的种间差异。
关键词：冬青属苦丁茶;绿原酸;反相高效液相色谱;资源利用
中图分类号：TS275.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）12-2889-03
Comparison of Chlorogenic Acid in Leaves from Six Ilex Species Used as Kudingcha by RP-HPLC
TIAN Jian-ping1a，1b，2，LI Juan-ling1c，HU Yuan-yan1d，LIU Guo-min1a，1b
（1.a.Kudingcha Research Institute，b.College of Agriculture，c.Horticulture and Landscape College，d.Key Laboratory for Tropical Biological Resources，Hainan University，Haikou 570228，China;2.Department of Pharmacy，Hainan Medical College，Haikou 571101，China）
Abstract：Chlorogenic acid in the mature leaf was extracted ultrasonically and analyzed by RP-HPLC from six Ilex species and I.kudingcha in different developing stage，region and storaging time，wild and cultivated samples. The results showed that the content of chlorogenic acid in fresh mature leaves of six species was I. kudingcha> I. huoshanesis> I. latifolia > I. centrochinensis > I. pentagona > I. cornuta. The significant decrease of chlorogenic acid in dried fresh leaf was observed after two months. In general，its content in old leaf was highest among different developing stage，and the content of wild leaf was higher than cultivation one. There were large differences among six Ilex species in the contents of chlorogenic acid.
Key words： Kudingcha species in Ilex L.; chlorogenic acid; RP-HPLC; resource utilization
苦丁茶是我国民间广泛用于制备代茶饮品（或茶药两用）的一大类代茶植物的统称。其原植物来源广泛，涉及12科13属，至少有36种之多（含变种和变型）[1-3]。冬青属苦丁茶是我国两大类最重要的苦丁茶之一。该类苦丁茶主要包括苦丁茶冬青（Ilex kudingcha C.J.Tseng），大叶冬青（I. latifolia Thunb），枸骨（I. cornuta Lindl），霍山冬青（I. huoshanesis Y.H.He，五棱苦丁茶（I. pentagona S.K.chen Y.X.Feng et C.F.Liang），华中枸骨（I. centrochinensis S.Y.Hu）等6个物种。这些苦丁茶物种主要分布于我国广东、广西、海南、浙江、安徽和贵州等省区[4-6]。根据种植面积、经济价值以及在国内外的影响情况，苦丁茶冬青被众多专家认定为“大叶苦丁茶”正品。冬青属苦丁茶中化学成分种类繁多，其中的绿原酸作为一种多酚活性成分，已广泛应用于食品、医药和日用化工等领域。目前，有关冬青属植物的绿原酸含量分析报道较少[7-9]。本试验采用HPLC法比较了不同品种、不同产地、不同来源、不同发育时期和贮藏条件下苦丁茶叶片样品中的绿原酸含量，为冬青属苦丁茶植物种质资源的合理开发利用及产品质量控制提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
冬青属苦丁茶叶片样品收集于全国各地，样品经海南大学黄世满教授鉴定，分别为冬青科植物苦丁茶冬青、大叶冬青、五棱苦丁茶、枸骨、霍山冬青和华中枸骨，其中苦丁茶冬青包含野生与栽培2类样品，其余5种均为栽培样品。凭证标本保存于海南大学苦丁茶研究所标本室，相关信息见表1。
绿原酸标准品（110753-200413，98%），购于中国食品药品检定研究院。